問：**近在做酵母雙雜交，有些營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基要單獨(dú)加氨基酸，不知道這些氨基酸配成母液以后能不能高溫高壓滅菌??？請(qǐng)各位高手指教，謝謝！

答：一般來說，在配制培養(yǎng)基過程中，在高溫高壓過程中易配破壞的成分如葡萄糖，氨基酸，抗生素等，多采用0.22um的濾膜過濾除菌。所以，建議樓主**好，過濾除菌后單獨(dú)加入。

問：基酸不能高壓滅菌嗎？可是在測定蛋白質(zhì)中氨基酸含量的時(shí)候，酸解的條件可是110℃濃鹽酸的條件下啊，這個(gè)反應(yīng)里的氨基酸可是可以跑HPLC的，而且氨基酸也基本不存在空間構(gòu)像問題。我在有些文獻(xiàn)中見過氨基酸用121℃滅菌15min的。不知大家有何意見？

答：你的培養(yǎng)基中含有葡萄糖等具有醛基的物質(zhì)，氨基酸與葡萄糖等在高溫下發(fā)生麥拉德反應(yīng)生成羰氨化合物降低了氨基酸的含量，另外這些物質(zhì)使培養(yǎng)基顏色加深，甚**對(duì)微生物產(chǎn)生毒害作用。一般來說將氨基酸過濾除菌，在培養(yǎng)基冷卻到五六十度的時(shí)候加入即可。

答：請(qǐng)參考G標(biāo)，可以測定高溫后的含量變化，其實(shí)就是個(gè)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，當(dāng)然樣品必須是單獨(dú)滅菌的了。Good luck！